第 51 卷第 1 期Vol. 51 No. 1
2021 年 2 月Feb 2021

所属栏目:分析与测试

光谱法研究2-乙基-3-甲基-吡嗪与牛血清白蛋白的相互作用
杨 莹1,胡琬岚1,刘 丹1,杨 可1,童文华1,2* (1. 四川轻化工大学 生物工程学院,四川 宜宾 644000;2. 中国科学院 青岛生物能源与过程研究所生物基材料重点实验室,山东 青岛 266101)
摘 要:利用荧光和紫外光谱法在模拟生理条件下,研究了牛血清白蛋白(BSA)和2-乙基-3-甲基-吡嗪(NEMP)的相互作用。应用Stern-Volmer方程、Lineweaver-Burk双倒数方程及F?觟rster非辐射能量转移理论,计算获得3个不同温度下(288、298、308 K)两者的猝灭常数(KSV)、结合常数(Kq)、结合距离(r)和热力学参数(ΔH,ΔG和ΔS)等。结果显示:在不同温度下,BSA 和NEMP均能相互结合生成新的复合物,且属于静态猝灭;结合距离小于7 nm;同步荧光显示NEMP对BSA的构象产生影响,主要是对其中酪氨酸残基有显著的影响;而在紫外光谱中BSA的最大吸收峰向较短波长偏移,BSA与NEMP之间形成了基态配合物。
关键词:2-乙基-3-甲基-吡嗪;相互作用;牛血清白蛋白;荧光光谱;紫外-可见光谱
中图分类号:O657.3  文献标识码:A  文章编号:1009-9212(2021)01-0068-05
Spectroscopic Study on the Interaction of a Novel 2-Ethyl-3-methylpyrazine(NEMP) and Bovine Serum Albumin
YANG Ying1, HU Wan-lan1, LIU Dan1, YANG Ke1, TONG Wen-hua1,2* (1. Key Laboratory of Liquor Making Biotechnology and Application, School of Biological Engineering, Sichuan University of Science and Engineering, Yibin 644000, China; 2. CAS Key Laboratory of Biobased Materials, Qingdao Institute of Bioenergy and Bioprocess Technology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266101, China)
Abstract:The interaction mechanism of bovine serum albumin (BSA) with 2-ethyl-3-methylpyrazine (NEMP) at three different temperatures was studied in Tris-HCl buffer solution at pH7.43. Refering to F?觟rster non-radioactive energy transfer theory, the Stern-Volmer quenching constant(KSV), the bimolecular quenching rate constant (Kq), binding distance (r) and the thermodynamic parameters (ΔH, ΔG and ΔS) between NEMP and BSA were measured. The results showed that BSA and NENP could form new complexes at three temperatures with static quenching mechanism. The binding distance was less than 7 nm. Synchronous fluorescence spectra showed that NEMP had an effect on the conformation of BSA, mainly on the Tyr residues. The maximum absorption peak of BSA in the ultraviolet absorption spectrum was shifted, and the ground state complex was formed between BSA and NEMP.
Key words:NEMP; interaction; bovine serum albumin; fluorescence spectrophotometer; ultraviolet spectrophotometer
基金项目:四川轻化工大学人才引进项目(2019RC31),中国科学院生物基材料重点实验室开放基金(BMF202011),四川轻化工大学大学生创新创业训练计划项目(S202010622069,cx2020107)。
作者简介:杨 莹(1986—),女,甘肃天水人,硕士,主要从事小分子与蛋白质相互作用的机制研究及相关项目资料申报工作。
联 系 人:童文华,讲师,博士,主要从事微生物遗传与生物合成方面研究(E-mail:604105426@qq.com)。
收稿日期:2021-01-25